Cromatografia de Pares de Íons

Mar 13, 2023

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A cromatografia de analitos carregados é muitas vezes desafiadora, pois eles não são retidos de forma eficaz nas colunas de fase reversa comumente usadas e eluem no volume morto. Em colunas com fases estacionárias polares ou aquosas, as formas dos picos podem ser ruins devido à retenção excessiva. Colunas de troca iônica que usam fases estacionárias carregadas para separar íons de cargas opostas são caras, adequadas para uma pequena gama de analitos e têm eficiência de separação limitada. A cromatografia de pares iônicos (IPC) é uma alternativa adequada para cromatografia de espécies polares ou iônicas.

O que é cromatografia de par iônico?

Como a cromatografia de fase reversa de par de íons difere de outros tipos de cromatografia de íons?

- Mecanismo de retenção

- Fatores que afetam a retenção

- Papel do efeito do par de íons

- Análise ambiental

- Análise farmacêutica e alimentar

- Análise biológica

- Análise de metais

Conclusão

IPC é um tipo de cromatografia de íons usado para separar analitos hidrofílicos ou carregados em colunas usando fase reversa ou fases estacionárias "neutras" que não carregam cargas. Envolve modificar a polaridade dos analitos carregados por meio de sua interação com um reagente de pareamento de íons que é adicionado à fase móvel. Essas moléculas de reagente carregam cargas opostas àquelas dos íons do analito com os quais são capazes de formar ligações eletrostáticas. Os pares formados entre os analitos e os íons reagentes se comportam como porções neutras e hidrofóbicas que podem ser separadas nas colunas C18 ou C8. O IPC é usado para a separação de ácidos orgânicos polares, bases e zwitterions, bem como íons inorgânicos.

Os reagentes de pareamento de íons também são conhecidos como aditivos de pareamento de íons ou hetaerons. Como essas moléculas possuem um grupo de cabeça polar e cadeias de hidrocarbonetos hidrofóbicos, elas se assemelham a um sabão (Figura 1). Consequentemente, essa técnica foi chamada de "cromatografia de sabão" quando foi introduzida por Göran Schill em 1973.1,2 Também é chamada de cromatografia de interação iônica, pois o íon reagente interage com a fase estacionária para regular a retenção de íons presentes na amostra .

A cromatografia iônica (IC) refere-se amplamente à separação de íons e inclui três mecanismos distintos, a saber, troca iônica, exclusão iônica e pareamento iônico. Quando a separação é provocada pela interação competitiva entre os íons do analito e os íons do eluente para os locais de cargas opostas na fase estacionária (Figura 2), o tipo de cromatografia é chamado de cromatografia de troca iônica (IEX).

Uma mistura de analitos não dissociados, parcialmente dissociados e totalmente dissociados pode ser separada por cromatografia de exclusão iônica (IEC), que também usa fases estacionárias carregadas (Figura 3). A fase móvel se acumula na superfície e dentro dos poros da fase estacionária levando à formação de uma "fase ocluída". Os analitos neutros são fortemente retidos na fase ocluída e eluídos por último da coluna. Os analitos parcialmente dissociados que têm interação ligeiramente menor com a fase móvel adsorvida eluem mais cedo. Os analitos totalmente dissociados e carregados que são repelidos pelos íons carregados de forma semelhante da fase estacionária, a "membrana de Donnan", eluem primeiro, completamente no volume vazio da coluna.

A cromatografia de fase reversa de par iônico é realizada em colunas não polares de "fase reversa" adicionando reagentes de pareamento iônico à fase móvel. Por exemplo, o ácido trifluoroacético é usado para parear com peptídeos carregados positivamente, enquanto as trialquilaminas são usadas para parear íons com ânions como carboxilatos ou oligonucleotídeos.

A cromatografia iônica de fase móvel (MPIC) é um termo frequentemente usado no contexto da separação de pequenos íons inorgânicos por IPC, seguida de sua detecção por medição de condutividade suprimida. Esta técnica é adequada para a análise de moléculas com cargas localizadas.