Imunoensaio qualitativo para a determinação de resíduos de antibióticos de tetraciclina em amostras de leite seguido por um HPLC quantitativo melhorado

Jun 19, 2023

Scientific Reports volume 12, Número do artigo: 14502 (2022) Citar este artigo

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O contaminante ambiental é um dos vários problemas que prejudicam as pessoas e a vida selvagem. Um exemplo de contaminantes emergentes atuais são os resíduos de antibióticos que podem estar presentes na água e nos alimentos. Embora os antibióticos sejam destinados a tratar ou prevenir infecções humanas e animais, os antibióticos também têm sido usados ​​como suplementos alimentares para animais por sua capacidade de promover o crescimento e a eficiência alimentar. Esse uso excessivo de antibacterianos resultou no acúmulo de resíduos de antibióticos em produtos alimentícios que são eventualmente consumidos pelo ser humano. A contínua exposição desnecessária de humanos a antibióticos por meio direto de animais ou leite, ou indiretamente por meio de plantas ou solo, pode aumentar a chance do surgimento de bactérias multirresistentes e, consequentemente, afetar adversamente a saúde humana. Novos regulamentos foram impostos em relação à utilização de antibióticos. Devido à escassez de dados sobre as condições de resíduos de antibióticos em diferentes tipos de alimentos destinados ao consumo humano na Arábia Saudita, este estudo propôs um método cromatográfico otimizado (HPLC-DAD) seguido de uma abordagem de imunoensaio para detectar especificamente antibióticos tetraciclinas em amostras de leite animal. O método foi realizado usando uma coluna RP-C18 com uma fase móvel composta por 0,01 M KH2PO4: acetonitrila:metanol (70:20:10, v/v/v) ajustado para pH 4. Foram observadas melhorias no método em termos de resolução e sensibilidade. O método de precipitação de proteínas usado para extração demonstrou alta porcentagem de recuperações de 85 a 101%. O método foi validado de acordo com as diretrizes da Conferência Internacional para Harmonização (ICH). É evidente a partir dessas descobertas que a presença de resíduos de antibióticos tetraciclina e oxitetraciclina em produtos lácteos do mercado saudita está abaixo dos limites residuais máximos (LMRs).

A poluição ambiental é um desafio que o mundo enfrenta no século atual. Esta questão é definida como "a contaminação dos componentes físicos e biológicos do sistema terra/atmosfera a tal ponto que os processos ambientais normais são prejudicados"1. Substâncias ou energias que se apresentam acima dos níveis naturais são consideradas poluentes1. Resíduos de antibióticos são uma forma de contaminante ambiental que pode estar presente em animais, plantas ou solo e pode promover o desenvolvimento de resistência microbiana. A resistência microbiana decorrente do uso desnecessário e exposição a antibióticos é definida como alterações nos mecanismos de resistência bacteriana ou o desenvolvimento de novos mecanismos em resposta a antibióticos específicos, uma classe de antibióticos ou vários tipos de antibióticos aos chamados patógenos multirresistentes. MDR)2. Na tentativa de preservar a atividade antimicrobiana, as autoridades reguladoras restringiram o processo de prescrição de antibióticos. No entanto, os antibióticos também são utilizados como conservantes de alimentos, para promover o crescimento e aumentar a produtividade de bovinos e aves, além de seu uso na medicina veterinária3,4,5. Pesquisas anteriores demonstraram que o uso de altos níveis de antibióticos para aumentar a produtividade animal está associado à presença de resíduos de antibióticos em alimentos de origem animal6,7,8. A exposição contínua de humanos a resíduos de antibióticos pode ser prejudicial ao ser humano aumentando a possibilidade de desenvolver reações alérgicas, perturbando a flora intestinal normal, ou pode transferir bactérias resistentes a antibióticos (ARB) ou genes de resistência a antibióticos (ARGs) de animais para humanos5.

Tetraciclina (TTR), clortetraciclina (CTC) e oxitetraciclina (OXY) estão entre os antibióticos mais utilizados na pecuária devido à sua eficácia e baixo custo9,10. Muitos estudos têm demonstrado a utilização inadequada desses antibióticos em todo o mundo e as consequências dessa prática6,11. Por exemplo, há uso descontrolado de antibióticos na ração mista de animais ou como conservantes na indústria alimentícia12,13. Além disso, os antibióticos são frequentemente administrados aos animais imediatamente antes do abate ou introduzidos na artéria carótida imediatamente após o abate para aumentar o período de armazenamento da carne fresca12. Eventualmente, as concentrações residuais de antibióticos podem exceder os limites residuais máximos (LMRs) permitidos pela União Europeia (UE) e pela Organização Mundial de Saúde (OMS).